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默科的 TRIzol LS 试剂是一种即用型试剂,用于在 1 小时内从人类、动物、植物、酵母或细菌来源的细胞和组织样本中提取高质量 的总 RNA(以及 DNA 和蛋白质)。 TRIzol LS 试剂是苯酚、异硫氰酸胍和其他专利成分的匀质溶液,可用于提取长链和短链 RNA。TRIzol LS 试剂可在样本匀浆化过程 中破坏细胞组分,并抑制 RNA 酶的活性,从而保持 RNA 的完整性。TRIzol LS 试剂可同时处理大量样本,是对 Chomcynski 和 Sacchi 开 发的一步法提取 RNA(Chomczynski 和 Sacchi,1987)的改进。 TRIzol LS 试剂能够从同一份样本中顺序提取 RNA、DNA 和蛋白质 ( Chomczynski,1993)。采用 TRIzol LS 试剂进行样本匀浆化后,加入氯仿,匀浆物可分成透明的上层水相层(含有 RNA)、中间层 和红色的下层有机层(含有 DNA 和蛋白质)。然后用异丙醇从水相层中沉淀出 RNA。用乙醇从中间层/有机层中沉淀出 DNA。利用异丙 醇从酚-乙醇上清液中沉淀出蛋白质。沉淀的 RNA、DNA 和蛋白质清洗掉杂质后,重悬进入下游应用。 提取的 RNA 可用于 RT-PCR、Northern Blot 分析、斑点印迹 杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA 酶保护分析和分子 克隆。 提取的 DNA 可用于 PCR,限制性酶消化和 Southern Blot 分析。 提取的蛋白质可用于 Western Blot 分析,某些酶活性的恢复和一些免疫沉淀实验。
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